hplc色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70Kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2-20um(5-10um)，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出，柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長(zhǎng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定，目的是為了避免管壁效應(yīng)。

　　色譜柱了解

　　1）平均顆粒度，顆粒度分布顆粒度(dp)越小：柱效越高(傳質(zhì)好，渦流擴(kuò)散小)柱壓越高(滲透性差)顆粒分布

　　顆粒分布越寬∶柱效低(滲透性差)

　　顆粒形狀球型∶柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻

　　無(wú)定型：柱床結(jié)構(gòu)不均勻流動(dòng)相線性速度不均勻，譜帶擴(kuò)展

　　2）鍵合相化學(xué)

　　1.影響化合物的分離度

　　2.不同鍵合相對(duì)不同種類的化合物分離不同

　　3.可能導(dǎo)致色譜的分離機(jī)理不同如：C18、C8、CN

　　3）含碳量

　　1.含碳量越高，k‘值越大（固定相傳質(zhì)效應(yīng)增加）

　　2.高含碳量 有利于不易保留的化合物的分離、水解穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好、有利于極性化合物的拖尾改善

　　3.低含碳量 有利于分析中性及堿性化合物、降低溶劑損耗、填料的端基封口、封口殘余硅羥基、減少不可逆吸附或拖尾、增加碳含量（0.1%-1%）

　　4）填料的端基封口

　　hplc色譜柱封口殘余硅羥基、減少不可逆吸附或拖尾、增加碳含量（0.1%-1%）

　　5）硅膠的活性

　　主要影響堿性化合物的保留行為：k'：生產(chǎn)硅膠時(shí)處理溫度不同，硅膠活性也不同，是選擇性差異的主要來(lái)源，硅膠的雜質(zhì)含量，重金屬含量低，硅羥基活性小，拖尾減小，是色譜柱質(zhì)量好壞的重要標(biāo)志，填料的穩(wěn)定性，硅膠填料，pH：2-8，聚合物填料，pH：2-12，pH值小于2時(shí)，鍵合相水解，液相色譜法能否將某一樣品*分離，主要取決于色譜柱的選擇性和柱效，這在很大程度上取決于固定相的選擇是否適當(dāng)。

　　6）色譜柱的規(guī)格：內(nèi)徑、檢測(cè)的靈敏度、樣品的容量

　　長(zhǎng)度、分離度，理論塔板數(shù)、速度、樣品的容量、檢測(cè)的靈敏度

　　7）柱性能評(píng)價(jià)：購(gòu)買的色譜柱，使用前都要對(duì)其性能進(jìn)行考察，使用期間或放置一段時(shí)間后也要重新檢查。柱性能指標(biāo)包括在一定實(shí)驗(yàn)條件下（樣品、流動(dòng)相、流速、溫度）下的柱壓、理論塔板高度和塔板數(shù)、對(duì)稱因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性，或分離度。一般說(shuō)來(lái)容量因子和選擇性因子的重復(fù)性在±5%或±10%以內(nèi)。進(jìn)行柱效比較時(shí)，還要注意柱外效應(yīng)是否有變化。

　　一份合格的hplc色譜柱評(píng)價(jià)報(bào)告應(yīng)給出柱的基本參數(shù)，如柱長(zhǎng)、內(nèi)徑、填料的種類、粒度、色譜柱的柱效、不對(duì)稱度和柱壓降等。