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分析規(guī)模和制備規(guī)模的HPLC有何不同?

更新時(shí)間:2021-12-21      點(diǎn)擊次數(shù):1930

       HPLC一般指高效液相色譜,是一種多功能的分析方法,可對(duì)各種化合物進(jìn)行分離和定量。它廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用、藥物分析、食品分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、精細(xì)化工產(chǎn)品分析等眾多領(lǐng)域。HPLC的技術(shù)都具有基本原理,比如樣品引入,色譜柱中樣品組分的分離以及最后使用多種檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。想了解制備型HPLC要先對(duì)分析型HPLC進(jìn)行初步研究,兩種技術(shù)之間的基本區(qū)別是操作規(guī)模,下面將重點(diǎn)介紹區(qū)別:

       明確分析的目標(biāo)

       在進(jìn)行分析之前,你應(yīng)該對(duì)分析目標(biāo)有清楚的了解。你是希望獲得有關(guān)樣品成分純度的信息然后進(jìn)行定性,還是希望能快速分離、純化產(chǎn)品。在第一種情況下,你可以使用分析型HPLC分離。在第二種種情況下,你可以使用制備型HPLC。

       規(guī)模

       在分析型中,樣品通量很小,通常為微升水平,而在制備型中,進(jìn)樣量很大,是分析型的幾百倍上千倍,從而可以產(chǎn)生毫克至克級(jí)的純化合物。為了達(dá)到這個(gè)效果,制備型選用的是大流速的泵,粗粒徑填料,粗管徑的色譜柱,以提高色譜柱的載樣量。

       尺寸

       與分析HPLC柱相比,制備型HPLC柱比較大。分析色譜柱通常直徑為4.6mm。恒譜生分析HPLC色譜柱基于高純硅膠,采用*鍵合技術(shù),具有優(yōu)異的峰形,更好的選擇、靈敏性和重要性?;|(zhì)金屬含量低,對(duì)所有類(lèi)型的分析物均表現(xiàn)良好峰形。機(jī)械強(qiáng)度穩(wěn)定性好,質(zhì)控嚴(yán)格,確保優(yōu)異的色譜柱性能和延長(zhǎng)色譜柱壽命。優(yōu)勢(shì)在于:平衡時(shí)間短;高流速,低背壓;使用壽命長(zhǎng);縮短分析時(shí)間,節(jié)約溶劑;高柱效,分離度佳。

 DSC_6651

       而制備色譜柱的內(nèi)徑通常在50-200mm的范圍內(nèi)。恒譜生C8、C18、C4制備液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管用316L不銹鋼制成,不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過(guò)拋光,提高柱效,減小管壁效應(yīng)。廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)境和食品等多個(gè)領(lǐng)域,滿足從實(shí)驗(yàn)室分析到工業(yè)大規(guī)模制備的不同需求。

 超高效液相色譜柱-DSC_4015

       與制備色譜柱相比,分析色譜柱填充的固定相粒徑范圍在3-5μm之間,而制備色譜柱填充的是大于10μm的較大顆粒。這樣的粒徑允許更高的塔流速,較長(zhǎng)的長(zhǎng)度和較寬的色譜柱直徑可提供較低的背壓。

       進(jìn)樣方式

       運(yùn)用分析色譜分析時(shí)通常涉及多種的樣品進(jìn)樣量,因此自動(dòng)進(jìn)樣器是首要選的進(jìn)樣方式。相反,在制備分離中,樣品數(shù)量很少,甚至可能只有一個(gè)樣品只是進(jìn)樣量較大,因此可以使用大體積進(jìn)樣環(huán)。

        探測(cè)器選擇

        由于分析要求,通常只將非破壞性檢測(cè)器(例如UV,熒光或折射率檢測(cè)器)用于制備級(jí)應(yīng)用。與分析色譜分離相比制備色譜樣品進(jìn)樣量大,因此檢測(cè)器具有更大的流通池。


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